2.-果蝇唾腺染色体的制备与观察

('实验果蝇唾腺染色体的制备与观察一、实验目的1.练习分离果蝇幼虫唾腺的技术，学习唾腺染色体的制片方法2.观察了解果蝇唾腺染色体的形态学及遗传学特征二、实验原理1．果蝇是双翅目昆虫，幼虫期具有很大的唾腺细胞，其中的染色体是巨大的唾液腺染色体；2．唾液腺染色体不断地进行自我复制而不分开，经过许多次的复制形成约1000～4000拷贝的染色体丝，合起来达5mm宽，400mm长，比普通中期相染色体大得多（约100～150倍），所以又称为多线染色体；3．唾液腺染色体具有许多重要特征，为遗传学研究的许多方面，如染色体结构、化学组成、基因差别表达等提供了独特的研究材料。三、实验材料与器具•三龄幼虫•0.9%生理盐水•改良苯酚品红1N盐酸•解剖镜解剖针吸水纸四、实验步骤(1)剥离唾腺在一干净的载玻片上滴一滴生理盐水，选择行动迟缓、肥大、爬在瓶壁上即将化蛹的三龄幼虫，或者选择经低温处理的果蝇三龄幼虫置于载玻片上。每只手各持一个解剖针，在解剖镜下进行操作。果蝇的唾腺位于幼虫体前1/3-1/4处，左手持解剖针按压住虫体后端三分之一的部位，固定幼虫，右手持解剖针扎住幼虫头部口器部位，适当用力向右拉唾腺腺体随之而出。唾腺是一对透明的棒状腺体，外有白色的脂肪组织（不透明）。去除幼虫其它组织部分，并把唾腺周围的白色脂肪剥离干净。(2)染色：吸去生理盐水，注意操作时要边观察边吸湿，最好用解剖针轻压，防止连同唾腺一起吸走；滴加胭脂红染色液，染色20-30min(3)压片：染色完成后，盖上干净的盖片，并覆一层滤纸。将片子放在实验台上，用大拇指均匀用力压片。（注意不要使盖片移动。）(4)观察：1、将制片置低倍镜下找到分散好的标本，移至视野中心，然后转到高倍镜下观察。2、对分散良好、染色体臂充分伸展的片子，应仔细观察染色体的横纹数量、形状和排列顺序，对照模式照片辨认出不同的染色体臂五、注意事项1.一定加生理盐水，否则唾腺易干。2.将脂肪组织清除干净3.水不可太多，否则幼虫会漂浮而且活跃4.染色时间不可过长，否则背景也着色5.压片时要揉，用力要均匀6.染色完以后，将旧的染色液吸去，加新的染色液，再压片7.吸水时勿将唾腺一起吸走六、实验结果七、分析讨论1.请画一个有代表性的果蝇唾腺染色体图。因为在实验中没有获得好的压片。所以无法画出果蝇的唾腺染色体图。2.总结实验过程中得到合格制片的要点。\uf06c染色时间要足够长\uf06c压片时不要使盖玻片移动，勿用力过大压碎载玻片\uf06c压片时适当多加些染液有利于染色体臂的伸展，但要防止染液过多而造成材料随染液而溢出3.果蝇巨大染色体有哪些特点？染色体巨大；多线染色体；体细胞联会；具有横纹；具有Puff（泡/疏松区）。4.制备果蝇唾腺染色体有何用处？\uf06c可以更好的了解果蝇作为模式生物用于遗传学研究的特点。\uf06c加深对果蝇染色体结构的认识。\uf06c了解体细胞染色体联会现象。',)